miRNA靶基因的预测与验证

miRNA主要通过与靶mRNA的结合，或促使mRNA降解，或阻碍其翻译，从而抑制目的基因的表达。用生物信息学方法准确快速地预测miRNA的靶基因，可以为研究miRNA功能提供线索。 k8.com提供miRNA靶基因的预测与验证相关课题服务，通过荧光报告素酶活性检测，结合软件预测及蛋白验证，提高靶点预测的精确性及可行性。

• 1、靶基因预测：使用软件对miRNA的靶基因进行预测或者根据靶基因对作用的miRNA进行预测；
• 2、质粒构建：提供miRNA mimics或者构建pri-miRNA质粒或者慢病毒、腺病毒病毒包装；提供miRNA inhibitor或者构建miRNA干扰质粒或者慢病毒、腺病毒病毒包装；构建靶基因的3’UTR野生型和突变型荧光素酶报告基因质粒；
• 3、细胞转染：将构建好的质粒和提供的miRNA mimics或者miRNA inhibitor分组共转染293T等工具细胞；
• 4、荧光素酶检测：使用双荧光素酶或者单荧光素酶试剂盒检测荧光素酶活性，从而获得miRNA对靶基因的作用数据。

1、提供miRNA名称或miRNA mimics化合物；

2、Gene ID 或者基因3’UTR序列信息。

• 1、靶基因3‘UTR载体的测序结果及载体构建实验报告；
• 2、靶点验证实验数据及实验报告。