【周二晚上八点】k8.com第二季分子互作主题直播首秀-免疫共沉淀技术（Co-IP）

信息来源：k8.com 作者：genecreate 发布时间：2020-10-19 10:33:17

        蛋白间相互作用是细胞各种基本功能的主要完成者，参与几乎所有的重要生命活动。因此，蛋白-蛋白相互作用研究以及建立相互作用的关系网络图，具有十分重要的意义，也是目前蛋白质研究领域的热点。
        Co-IP（免疫共沉淀，co-inmunoprecipitation）是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术，能够特异性富集所研究的目的蛋白。由于过程中采用了非变性条件，保留了互作及复合体的细胞内状态。相对于酵母双杂交、pull down等方法，其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内，保存了互作蛋白及复合体的“内源”状态。
Co-IP实验原理
        以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
        当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
 Co-IP实验优势
a)   取材可以选择该目的蛋白所在物种、特定组织、细胞，因此CoIP能够反应该蛋白在天然组织细胞状态下存在的互作关系蛋白；
b)   找出整个复合体中直接/间接互作的多个蛋白，研究复合体组成；
c)   通过与质谱鉴定连用可以初筛到一系列未知蛋白，再通过其他技术进一步验证。
 Co-IP实验注意事项
a)需要特异性IP级别诱饵蛋白抗体（重点）；
b)如果没有特异性抗体，则需要考虑构建重组标签质粒，用标签抗体进行CoIP实验；
c)样品种类实验风险：过表达细胞样品<细胞样品<动物组织样品<植物样品（通常为转基因植物，标签抗体也很难达到特异性富集）；
d)CoIP-MS风险：由于存在特异性抗体高丰度蛋白，质谱不一定能够鉴定到诱饵蛋白。
如果您在蛋白互作亦或是分子互作研究中存在困扰，快来报名k8.com第二季免费实验直播吧！
 直播亮点
摆脱传统的授课式理论教学，实验室同步直播让您眼见为实；
实验操作和疑问解答同时进行，各种实验小技巧轻松get；
直播时间固定在每周二晚八点，所有直播均提供回放；
如果您刚好需要做这项技术服务，也可以通过直播了解k8.com的仪器设备、团队实力；
实物礼品，项目代金券、现金红包都已准备好，让实验等待期不再枯燥。
 第二季八期直播安排
 第二季第一期预告
 温馨提示
各位老师/同学还可以联系当地销售或添加客服微信（15327327477）拉你入群一起交流学习！




X
k8.com
    网站地图